{"id":13591,"url":"\/distributions\/13591\/click?bit=1&hash=df3f51932e322e3fb35802787499cfa73234707acb315167066f304d6d8cee2b","title":"\u041a\u0443\u043f\u0430\u0436\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435 \u0447\u0430\u044f \u0438 \u044d\u043a\u0441\u043a\u0443\u0440\u0441\u0438\u0438 \u0432 \u0442\u0430\u0431\u0443\u043d: \u043a\u0443\u0434\u0430 \u0435\u0445\u0430\u0442\u044c \u043d\u0430 \u0442\u0438\u043c\u0431\u0438\u043b\u0434\u0438\u043d\u0433","buttonText":"\u0427\u0438\u0442\u0430\u0442\u044c","imageUuid":"d85f2cfe-e0d7-5ad7-8507-983bc3b55643","isPaidAndBannersEnabled":false}
ПрофЛаб

Изучение сложных системных иммунных реакций у гуманизированных мышей

Хотя многие млекопитающие имеют иммунную систему, которая имеет сходства с людьми, некоторые типы и явления иммунных клеток являются уникальными для нас. В результате было трудно разработать и провести эмпирические исследования, которые помогут исследователям точно предсказать клинические реакции на терапевтические препараты, инфекционные заболевания, рак и другие стимулы, которые могут вызвать иммунный ответ. В частности, общесистемные иммунные нарушения, такие как синдром высвобождения цитокинов (CRS) и трансплантат ниже по течению против. болезнь хозяина (GvHD) остается невероятно сложной для изучения, профилактики и лечения. In vitro исследования не отражают каскадных эффектов, которые иммунная система может оказывать на широкий спектр тканей in vivo исследования на животных, таких как грызуны и приматы, не являющиеся людьми, исторически не смогли предсказать токсичность, связанную с уникальными типами иммунных клеток человека

Для решения этих проблем лаборатория Джексона (JAX) разработала универсальный набор моделей мышей, способных поддерживать обширные функциональные компоненты иммунной системы человека. Эти мыши предоставляют доклиническую исследовательскую платформу, которая дает чувствительные, воспроизводимые результаты для скрининга кандидатов на лекарства на воспалительные реакции. Платформа также предлагает понимание прогрессирования иммунных расстройств и потенциальной эффективности лекарств, предназначенных для их лечения.

Гуманизирующие мыши для иммунологических исследований

Чтобы создать нашу гуманизированную платформу для мышей для изучения иммунных реакций на основе Т-клеток, мы создали мышей с иммунодефицитом (NOD-scid IL2rgnull или NSG) с мононуклеарными клетками периферической крови (PBMC) от доноров-людей. PBMC включают в себя различные иммунные клетки, но в этой модели приживления преобладают Т-клетки, позволяющие нам воссоздать опосредованный Т-клетками иммунный ответ у мышей.

В валидационных исследованиях было обнаружено, что можем надежно вызывать дозозависимый ответ CRS в этих гуманизированных моделях мышей с использованием соединений, которые, как известно, вызывают клиническую CRS, и что не было ответа CRS на иммунотерапии, которая, как известно, была клинически безопасной. Полученные результаты также отражают изменение высвобождения цитокинов, наблюдаемое у отдельных доноров PBMC человека, с большей чувствительностью и более воспроизводимыми результатами, чем in vitro анализы, выполненные с клетками от тех же доноров .

Изучение того, как CRS влияет на органы

CRS возникает, когда иммунная система чрезмерно реагирует на раздражитель, такой как лекарство или заболевание. Активированные лейкоциты наводняют организм избытком белков, сигнализирующих о цитокине, которые активируют больше лейкоцитов и создают опасный эффект снежного кома, который может привести к лихорадке, недостаточности органов и даже смерти.

С нашей гуманизированной моделью мыши мы смогли измерить не только уровни различных человеческих цитокинов, выделяемых в кровоток после введения препарата, но и наблюдать за эффектами, которые эти цитокины оказывают на организм с течением времени. Наблюдая изменения массы тела и собирав сыворотку для анализа уровня ферментов почек и печени. Также были собраны образцы тканей из печени и легких для проведения гистопатологических исследований с использованием окрашивания гематоксилином и эозином (H & E), окрашивания каспазой 3 и обнаружения некроза отдельных клеток в гепатоцитах.

Рисунок 1. Сравнение клинического периода полувыведения сыворотки трех терапевтических антител с соответствующим периодом полувыведения у а) мышей WT или b) мышей FcRn, гуманизированных (Tg32), соответственно. R-квадрат модели линейной регрессии показан на графике, что указывает на сильную корреляцию между человеческим PK этих молекул и таковой у мышей, гуманизированных FcRn, но не у животных WT.

Как и ожидалось, на основе уровней высвобождения цитокинов гуманизированные мыши, обработанные соединениями, которые, как известно, вызывают CRS, показали снижение массы тела и испытали серьезное повреждение органов, которое уменьшило функциональность. Мы можем продолжить уточнение этих исследований, чтобы лучше понять, как такие факторы, как изменение дозировки, могут изменить влияние CRS на органы вниз по течению

Моделирование GvHD Progression

Мы также создали гуманизированных мышей для моделирования GvHD, который влияет на целые системы органов и может развиваться из CRS, который слишком долго не лечится. Мы создали эти модели, обрабатывая мышей NSG облучением, а затем прививая их человеческими PBMC - процесс, аналогичный нашим другим исследованиям. Тем не менее, было важно, чтобы доноры PBMC для этого конкретного исследования уже были предварительно охарактеризованы специально для их ответа GvHD.

Мы отметили, что прогрессирование и тяжесть GvHD в гуманизированных моделях мышей специфичны для отдельных доноров PBMC и близко отражают разнообразие и диапазон выраженности реакций GvHD, наблюдаемых у реципиентов трансплантата человека. Это указывает на то, что, как и в случае с CRS, эта платформа может когда-нибудь использоваться для составления индивидуальных прогнозов о том, как иммунная система пациентов будет реагировать на лечение.

Мы провели первоначальное исследование, чтобы продемонстрировать полезность этой платформы для доклинического тестирования новых лекарств, предназначенных для лечения осложнений иммунного трансплантата, таких как GvHD. Мы использовали модель для сравнения Abatacept, иммуномодулятор, который, как известно, замедляет прогрессирование GvHD, к высоким и низким дозам биспецифического антитела, предназначенного для достижения того же.

Рисунок 1. Сравнение клинического периода полувыведения сыворотки трех терапевтических антител с соответствующим периодом полувыведения у а) мышей WT или b) мышей FcRn, гуманизированных (Tg32), соответственно. R-квадрат модели линейной регрессии показан на графике, что указывает на сильную корреляцию между человеческим PK этих молекул и таковой у мышей, гуманизированных FcRn, но не у животных WT.

У людей с GvHD Abatacept уменьшает расширение Т-клеток и высвобождение цитокинов и улучшает выживаемость. По сравнению с контрольной группой, дозы Abatacept и биспецифических антител продемонстрировали все три из этих эффектов. Высокая доза биспецифического антитела показала лучшие результаты, чем Abatacept в последние недели исследования; этот результат демонстрирует, что эта гуманизированная платформа мыши может предоставить нюансированную информацию об эффективности и способе действия любого нового препарата, предназначенного для лечения GvHD.

Команда ПрофЛаб готова обустроить виварий под ключ и поставить самые передовые решения для более качественных и быстрых исследований под вашу задачу. Мы поможем не только с поставкой, но и с вводом в эксплуатацию. Будем рады сотрудничать!

0
Комментарии
Читать все 0 комментариев
null